北京協(xié)和醫院-奧林巴斯顯微鏡下的精子（組圖）

一、操作程序簡(jiǎn)述

1濕法分析包括下列內容：①濁度，②凝集；②精子計數及其活動(dòng)力評估o

2．活動(dòng)擺子百分率及其動(dòng)力學(xué)測定①主觀(guān)方法；②客觀(guān)方法。奧林巴斯顯微鏡

3．稿子計數①血細胞計數器；②Msrkler計數池；③計算機輔助的精液分析（con-Puter-assistedsemenanalysis,CASA）。

4．制備精液讀片桔液涂片、精液染色、形態(tài)學(xué)分析。

在確定精子數量和活動(dòng)力過(guò)程中，無(wú)論采用何種技術(shù)，對每一個(gè)精液樣品均需用濕法或“濕操作”．此法將使檢驗人員對稿于計致、活動(dòng)情況和有關(guān)動(dòng)力學(xué)具有一個(gè)初步的主觀(guān)印象，并可測定濁度和強度；在測定稿子計數及其活動(dòng)力過(guò)程中，溫度顯得很重要。顯然，37°是*選擇；然而，如缺乏調節溫度的顯微鏡操作臺，整個(gè)分析過(guò)程要在此條件下完成是不可能的。通常．精液分析在室溫中進(jìn)行。正如人們所知．室溫變化范圍很大，因此，必須盡量控制操作區域的溫度。

（一）方法

精液*液化后，充分混勻，加一滴未稀釋桔液于干凈玻片上，蓋上蓋玻片。也可用自動(dòng)加樣器吸lo微升精濃加至載玻上以提高測定的可重復性。在放大200—400倍（高倍鏡）的情況下觀(guān)察20個(gè)視野，評價(jià)活動(dòng)稻子的百分率、相對運動(dòng)速度和方向以及每一高倍視野下的精于數，評價(jià)其濁度和是否有凝塊，確定“圓形細胞”（未成熟微生物細胞和白細胞）的百分率。奧林巴斯生物顯微鏡

（二）濁度

顯然，成熟館子在精掖中占多數。但有時(shí)也會(huì )發(fā)現其他細胞或碎片。來(lái)自男性生殖道的亡皮細胞也會(huì )存在于精液中。在高倍鏡下，偶爾發(fā)現上皮細胞并非病理指征。但息尿道炎的男子其棺液中可出現大量上皮細胞；有時(shí)亦可見(jiàn)陰道源性的上皮細胞，這種情況表明俏液樣品是經(jīng)性交中斷法收集的．此類(lèi)細胞應在報告單上注明。北京奧林巴斯顯微鏡

不成熟的病原茵細胞和白細胞也常在精液中出現，在染色破片上難以區別，而應用濕法操作法則更不可能。通常用巴氏（Papnicolaou，PAP）染色來(lái)觀(guān)察這種“圓形細胞“（大于或等于成熟稻子的10％）；而濕法分析有助于確定哪些樣本需用這一方法進(jìn)一步制備。應對白細胞的確切數目和不成熟病原茵的百分串加以確定和記錄（詳見(jiàn)后述）。

在精液中，還可能出現其他顆粒性物質(zhì)如梢膚結晶、滑石粉和殺桔劑顆粒，如發(fā)現量很大，則應加以記錄。粗大茵體、毛滴蟲(chóng)、念珠菌更應加以報告。

（三）凝集

徠卡顯微鏡在某些（非全部）含抗精子抗體的桔液樣本中，精于可能發(fā)生自發(fā)性凝集，應在主觀(guān)判斷的基礎上加以報告并記錄凝集類(lèi)型和程度，凝集程度的評價(jià)用0-Ⅳ表示（表44）。精子凝集方式注明為：頭—頭、頭—尾、尾—尾或混合型。有時(shí)出現格子粘附于碎片或其他顆粒性物質(zhì)的現象，應與真性凝集區別開(kāi)來(lái)。這種現象除非根嚴重，否則一般不作報告。出現精于凝集提示應作特異性抗精子抗體的檢測（見(jiàn)有關(guān)章節）。

（四）評估精于數、活動(dòng)率及其動(dòng)力學(xué)

在精液分析報告中應記錄棺子數，避免出現少數、幾個(gè)、很多、大量館子等主觀(guān)性估計。但是，如果每高倍視野觀(guān)察到大量精子而實(shí)際計數所反映數量有所下降，應該懷疑結果的難確性，并重新化驗；徠卡顯微鏡此外，還應對精子活動(dòng)串（25％、50％、75％或大于80％）和動(dòng)力學(xué)特征（緩櫻隨意運動(dòng)和快速直線(xiàn)運動(dòng)）作出主觀(guān)評價(jià)，并與以客觀(guān)方法測定的結果相比較。顯然這種方法的主觀(guān)性很強，在測定者之間甚至同一測定者身上易產(chǎn)生差異。然而，這些“主觀(guān)的粗略分析”常會(huì )提示客觀(guān)分析方法的潛在錯誤。