顯微鏡行業(yè)*德國徠卡顯微鏡2014年技術(shù)

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三維定位顯微鏡的新型超分辨率系統

05 九月 2013

Leica SR GSD 3D - 三維單分子和細胞結構的高度和可重復的定位

德國韋茨拉爾。超分辨率是光學(xué)顯微鏡的大勢所趨。徠卡擴展了其超高分辨率顯微鏡產(chǎn)品組合，現已推出了Leica SR GSD 3D，一個(gè)同時(shí)能為分子和細胞結構提供二維和三維超分辨率成像的廣角系統。寬視場(chǎng)熒光顯微鏡采用了GSD（基態(tài)耗盡）ordSTORM技術(shù)，達到了橫向20納米、軸向50nm的分辨率。Leica SR GSD 3D也以其在定位單分子、其系統穩定性及其光學(xué)性能方面*的性贏(yíng)得好評。這些屬性對于在很短的時(shí)間內產(chǎn)生可重現性的高品質(zhì)結果是*的。Leica SR GSD 3D的優(yōu)勢通過(guò)全自動(dòng)系統和軟件的簡(jiǎn)單操作而實(shí)現的。

Leica SR GSD3D配備了專(zhuān)門(mén)為超高分辨率顯微鏡開(kāi)發(fā)的160倍的高性能物鏡。其設計進(jìn)行了優(yōu)化，可用于高功率激光輻射。極低的自體熒光保證了較高的信噪比，這對于單分子檢測應用是頗為理想的。為了能在z向上進(jìn)行分子定位，即焦平面的上方和下方，Leica SR GSD 3D采用了像散效果。像散實(shí)際上是一種像差，但卻是特意用柱面透鏡創(chuàng )造出來(lái)的。對應的圖像能夠確定檢測到的分子的z位置，從而實(shí)現三維重建。為了保證結果的可重復性，柱面透鏡能地定位到光路中，只要該系統從二維切換到三維錄制-不是用手，而是用鼠標點(diǎn)擊通過(guò)軟件控制來(lái)自動(dòng)完成。

Leica SR GSD 3D已以多種方式進(jìn)行了優(yōu)化，可產(chǎn)生可靠的定位結果。所有的光學(xué)元件在復消色差方面均進(jìn)行了修正，達到了較高的徠卡標準。在此基礎上，該軟件使系統能進(jìn)行的校準，對x、y和z中的分子進(jìn)行定位。 除了用黃金珠進(jìn)行標準的校準外，也可用樣本的熒光珠或染料分子進(jìn)行特定顏色的校準。特殊的SuMo技術(shù)（SUpressed MOtion）確保檢測過(guò)程中漂移量zui低，穩定性zui高。

“對具備納米級分辨率的細胞結構進(jìn)行三維觀(guān)察可以讓科學(xué)家們在生物醫學(xué)研究中獲得新的見(jiàn)解，”徠卡公司的廣角成像主管Sebastian Tille解釋說(shuō)。“比如，新型Leica SR GSD 3D是一個(gè)*的工具，能更好地了解分子結構或細胞蛋白輸運過(guò)程。專(zhuān)家已經(jīng)確認了*批測試之后新系統出色的性能和可靠性。

Leica SR GSD 3D是基于一個(gè)全自動(dòng)的TIRF系統（全內反射熒光），允許超分辨率與TIRF顯微鏡相結合。該系統也可用于活細胞或先進(jìn)的熒光顯微鏡的各個(gè)領(lǐng)域中的各種應用。作為一個(gè)多功能系統，Leica SR GSD 3D使研究人員可以按其所需自由地將系統進(jìn)行地定制。GSD技術(shù)的另一個(gè)重要的優(yōu)點(diǎn)是，它可與標準的熒光標記共同使用。Leica SR GSD 3D是Leica SR GSD的升級版，多次受到專(zhuān)家委員會(huì )的認可，如獲得的R＆D100大獎。

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